Cuando Jay Mohr era un niño que crecía en Verona, Nueva Jersey, ya soñaba con ser actor. Una vez ya joven adulto, vio cumplido el sueño, primero logrando la fama como monologuista cómico y, luego, abriéndose paso en la televisión y el cine. Al principio de su carrera, Mohr logró notoriedad por sus extraordinarias e hilarantes imitaciones de Christopher Walken, Ricki Lake, y Sean Penn. Efectuó su debut televisivo como integrante de "Not ready for prime time players", en Saturday Night Live, de la NBC. Mientras participaba en el show,  Mohr recibió una nominación al Emmy por este trabajo. 

Tras dejar este espacio televisivo, Mohr empezó a actuar como estrella invita en otros shows, efectuando apariciones estables en Jeff Foxworthy Show (1995) y en la serie Local Heroes (1996). Por su labor como presentador de Lip Sservice (1995), de la MTV, logró el Espy Award. Su debut en lo narrativo fue en el telefilm The Barefoot Executive (1995), sin embargo, su verdadera irrupción en la pantalla, logrando reconocimiento de la crítica, fue por su papel como el odioso agente deportivo Bob Sugar, junto a Tom Cruise, en el gran éxito de taquilla Jerry Maguire, dirigida por Cameron Crowe.

Después de encarnar a un chico simpático en Novio de Aquiler, y de dar un giro interpretativo como hijo de Ellen Burstyn, afectado por el SIDA, en Jugando con el Corazón, con Sean Connery y Gillian Anderson, Mohr fue protagonista de dos largometrajes de perfil alto en 1999: la muy esperada 200 Cigarrillos, y la aplaudida Viviendo sin Límites, de Doug Liman. En ambas cintas, Mohr se integra a un reparto de futuras promesas de la interpretación; en la primera, dando vida al tipo que priva a Kate Hudson de su virginidad, y en la segunda, como actor gay de culebrones.

El mismo año, regresa a sus raíces televisivas en Caps, un show de la Fox que le muestra como un ejecutivo cinematográfico desagradable y malhablado, trasunto del infame Joel Silver. Además de su trabajo para la gran pantalla, Mohr continúa apareciendo en numerosas exhibiciones televisivas de monologuistas cómicos y en talk shows como Late Night With Conan O'Brien. 

Ha aparecido en Cadena de Favores, de Mimi Leder, con Kevin Spacey, Helen Hunt, Haley Joel Osment, y James Caviezel, así como en Cherry Falls, una producción de October Films, Simone, de New Line Cinema, y en la comedia de ciencia ficción Pluto Nash, de Castle Rock, con Eddie Murphy, Dennis Quaid y Pam Grier.